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一開(kāi)始知道聚乙二醇(PEG)這種物質(zhì)，是源于大學(xué)本科課程《藥物制劑》，從書中了解到PEG是以多種角色參與到藥物的制劑研發(fā)過(guò)程當(dāng)中。如今再聊PEG，則是源于接到很多客戶關(guān)于PEG抗體的咨詢，多半是很難找到合適的工具，借此機(jī)會(huì)，跟大家聊聊，希望對(duì)大家有所裨益。

關(guān)于PEG

聚乙二醇( PEG )是由重復(fù)的乙二醇(- ch2 - ch2 - o -)單元組成的合成聚合物。它毒性低，親水性強(qiáng)，在水溶液中有很大的排斥體積。聚乙二醇的共價(jià)結(jié)合( PEG 修飾)常被用來(lái)修飾各種蛋白質(zhì)和藥物。聚乙二醇化有許多好處，包括降低免疫原性、提高生物藥效率和優(yōu)化藥代動(dòng)力學(xué)。

PEG的用途

PEG作為藥用輔料至今，已有上百年的歷史。由于PEG毒性小，水溶性好，長(zhǎng)期以來(lái)倍受廣大藥劑工作者的青睞，廣泛的被應(yīng)用于注射劑、局部用制劑、眼用制劑、口服及直腸用制劑等多種藥物劑型。PEG在水中具有較好的溶解性和良好的與藥物及其他溶劑的相溶性，相對(duì)分子質(zhì)量小的液體PEG可以在制劑中作為溶劑使用，相對(duì)分子力量大的固體PEG可以與難溶性藥物制成固體分散體，以促進(jìn)藥物的溶出。

20世紀(jì)70年代，Davis等報(bào)道用PEG修飾蛋白質(zhì)，之后相繼開(kāi)展了許多PEG與蛋白質(zhì)和小分子藥物共價(jià)結(jié)合的研究。藥物的PEG修飾即PEG化，是將活化的PEG通過(guò)化學(xué)方法偶聯(lián)到蛋白、多肽、小分子有機(jī)藥物和脂質(zhì)體上。

PEG 抗體及應(yīng)用

由于 PEG 的無(wú)電荷性和生物相容性，它的免疫原性不強(qiáng)，使得 PEG 很難產(chǎn)生抗體。經(jīng)過(guò)大量研發(fā)，abcam已經(jīng)成功地產(chǎn)生了多種高質(zhì)量 PEG RabMAb 一抗。

抗 PEG 抗體可用于監(jiān)測(cè)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)，包括其分布、代謝和排泄等。

舉個(gè)例子：藥代動(dòng)力學(xué)是對(duì)藥物在體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄的時(shí)間過(guò)程進(jìn)行的計(jì)算。為了檢查抗 PEG RabMAb 一抗在追蹤動(dòng)物模型中聚乙二醇化抗原在代謝率方面的有效性，進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)：

向大鼠腹膜內(nèi)注射 100 μg 小鼠 IgG-PEG，用作抗原。

分別于注射后 0.5、1、2、4、10、24 和 48 小時(shí)采血。

提取抗血清并在 ELISA 測(cè)定中使用抗 PEG RabMAb 抗體檢測(cè) IgG 濃度。

在包被有 5 μg/mL 抗 PEG RabMAb 抗體（ab51257, 克隆：PEG-B-47）的 96 孔板中，加入 PEG-HRP 和抗血清。

使用來(lái)自大鼠抗血清的定量 IgG 濃度以及由 IgG-PEG + HRP-PEG 競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)定產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖 1），可以確定注射的小鼠 IgG-PEG 在各個(gè)時(shí)間的濃度（圖 2 ) 。

如下所示，抗 PEG RabMAb 抗體可用于定量感興趣的靶標(biāo)并研究系統(tǒng)內(nèi)聚乙二醇化藥物或抗原的藥代動(dòng)力學(xué)（圖 2 ) 。

圖 1：使用不同量的 IgG-PEG 和 PEG-HRP 以 1 : 30,000 的稀釋系數(shù)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性 ELISA 測(cè)定。

圖 2：使用 5 μg/mL 抗 PEG RabMAb 抗體（ab51257, 克?。篜EG-B-47）檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)（h）抗血清中小鼠 IgG-PEG 的濃度 (μg/mL)

另外，抗 PEG 抗體還可用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ ELISA ）、蛋白質(zhì)印記（ WB ）和免疫組化（ IHC ）實(shí)驗(yàn)中聚乙二醇化分子的質(zhì)量控制。

再舉個(gè)例子：使用我們的抗 PEG 抗體檢測(cè)不同石蠟包埋組織樣本中的局部 PEG 化抗原。小鼠腹腔注射 100µg BSA-PEG 作為抗原。4小時(shí)后用抗 PEG RabMAb 一抗對(duì)心臟、腎臟、肝臟和脾臟組織進(jìn)行染色。

▲免疫組化分析: 1a.小鼠心臟組織和 1b.小鼠腎臟組織注射100µg的BSA-PEG 4小時(shí)后，使用抗 PEG RabMAb 一抗 (ab51257) 檢測(cè)。

▲免疫組化分析: 1c. 小鼠肝臟組織和 1d. 小鼠脾臟組織注射 100µg BSA-PEG 4小時(shí)后，使用抗PEG RabMAb 一抗 (ab51257) 檢測(cè)。

▲免疫組化分析: 1e. 陰性對(duì)照-小鼠心臟組織和 1f. 陰性對(duì)照-小鼠腎臟組織使用抗 PEG RabMAb 一抗 (ab51257) 檢測(cè)。